Selección de nanoanticuerpos contra antígenos tumorales mediante la utilización de una biblioteca sintética expresada en la superficie de fagos filamentosos
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Author
Salazar Uribe, Julieta
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Abstract
El factor de crecimiento epidérmico (EGF) se produce principalmente de forma paracrina y su concentración en suero humano es muy variable, pero tiende a ser mayor en paciente con cáncer. Es uno de los ligandos más importantes del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR). Otro antígeno importante en el desarrollo de cáncer es el factor de necrosis tumoral alfa TNFα como una citocina proinflamatoria. El TNFα es una citocina de 17 kDa con 157 aminoácidos, producido principalmente por macrófagos activados, linfocitos T y células asesinas naturales (NK), también en menor cantidad por células tumorales. Con el objetivo de generar nanoanticuerpos específicos contra diversos antígenos a partir de una biblioteca sintética mediante la tecnología de la presentación de proteínas en la superficie de fagos filamentosos, se realizaron dos estrategias de selección. Las variaciones entre las estrategias utilizadas consistieron en modificaciones en los lavados, las eluciones y la cantidad de rondas de enriquecimiento Utilizando cuatro eluciones diferentes consecutivas y tres rondas de enriquecimiento obtuvimos 4 nanoanticuerpos específicos de EGF, mientras que utilizando una única ronda de selección y condiciones astringentes de lavado y elución logramos obtener 21 nanoanticuerpos específicos de TNFα. La metodología de elución que se emplea durante la realización de la técnica de Phage Display podría influir en la diversidad de secuencias de los fagos que reconocen el antígeno de interés.
Collections
- Tesis [710]